Plataforma de Microscopía de Fuerza Atómica
El Microscopio de Fuerza Atómica es un microscopio de barrido de alta resolución cuyo funcionamiento se basa en las fuerzas de interacción entre una punta de dimensiones nanométricas y la muestra a analizar. Permite analizar la topografía y las propiedades mecánicas de todo tipo de materiales (conductores y no conductores, incluyendo material biológico vivo) a escala nanométrica.
En particular el MFA del IIBCE tiene acoplado un microscopio de óptica invertida de epifluorescencia (Olympus XI81) con cubos de fluorescencia para verde y azul, y objetivos 10X, 20X, 40X y 60 X secos que posibilita la combinación de imágenes topográficas con el marcaje de células y tejidos utilizando colorantes, sondas o anticuerpos específicos. Cuenta además con un controlador de temperatura que permite hacer experimentos con células vivas.
Permite obtener imágenes de alta resolución de un área de escaneo entre 10 nm2 y 150 µm2 cuadradas de muestras con hasta 15 µm de altura, así como obtención de curvas de fuerza a nivel de célula única (gráficas de tensión en función de deformación, que permiten hallar Módulo de Young y adhesión de la muestra).
Integrantes
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 | Lihuén Villarreal Técnico de Plataforma |
Responsable de plataforma: Dr. Juan C. Benech jbenech@iibce.edu.uy
Técnico: de Plataforma: Lihuén Villarreal afm.iibce@gmail.com
Horario: lunes a viernes de 9 a 16h
Por consultas y asesoramiento: jbenech@iibce.edu.uy ; afm.iibce@gmail.com
Teléfono de contacto: (598) 24871616 ext. 107 (LSCNB)
Costo del servicio
El tiempo mínimo por el que se puede contratar el AFM es 4 horas (1 sesión de AFM). En caso de ser necesario el uso de la lámpara fluorescente, o el análisis de curvas de fuerza, se agregará un costo adicional por éstos conceptos.
Para usuarios institucionales (Investigadores del IIBCE):
Sesión de 4 horas de AFM: US$ 18
Hora extra adicional: US$ 4
Cada hora de uso de la lámpara UV: US$ 2
Cada hora de análisis de curvas de fuerza: US$ 9
Para investigadores de la UdelaR, IPMont u otras instituciones académicas:
Sesión de 4 horas de AFM: US$ 25
Hora extra adicional: US$ 6
Cada hora de uso de la lámpara UV: US$ 3
Cada hora de análisis de curvas de fuerza: US$ 13
Para otros usuarios:
Sesión de 4 horas de AFM: US$ 34
Hora extra adicional: US$ 8
Cada hora de uso de la lámpara UV: US$ 4
Cada hora de análisis de curvas de fuerza: US$ 18
En caso de experimentos más complejos, que requieren varias sesiones de adquisición de imágenes o curvas de fuerza, quien solicite el servicio deberá proveer una caja de puntas adecuadas para el mismo, que se utilizará únicamente para esa muestra. En ese caso se estudiará la viabilidad de los experimentos y se le asignará un costo por horas de uso de lámpara UV y horas de análisis de curvas de fuerza.
Funcionamiento
En cualquier momento pueden solicitarse reuniones de consulta con el técnico de la plataforma, sin costo alguno, para discutir posibles experimentos.
Horario disponible del técnico: lunes a viernes de 9 a 16 horas.
Ponerse en contacto con jbenech@iibce.edu.uy ; afm.iibce@gmail.com
Equipo:
Microscopio de Fuerza Atómica (Veeco, ahora Bruker), modelo Bioscope Catalyst equipado con mesa neumática para aislación de todo tipo de interferencia acústica y eléctrica, y platina termostatizada para experimentos in vivo.
Tecnologías disponibles
- Diferentes tipos de puntas que permiten la obtención de imágenes y el análisis mecánico de muestras variadas.
- Localización de una región especifica de la muestra (por intermedio del microscopio óptico de epifluorescencia con platina motorizada) para realizar imagenologia por AFM.
- Cámara digital, que permite obtener imagen de microscopia óptica de la región de la muestra a ser analizada por AFM.
- Platina termostatizada que permite trabajar con células vivas.
Tipo de Prestaciones
- Imágenes de alta resolución (2048 x 2048) con un área de escaneo entre 10 nm2 y 150 µm2 de muestras con hasta 15 µm de altura
- Imagenología de células vivas: a) Identificación de biomoléculas y estructuras celulares; b) Observación de eventos de interacciones celulares y adhesión celular
- Imagenología de alta resolución de moléculas: a) ADN y plásmidos; b) Estructura de biopolímeros; c) Imagenología de membranas biológicas; d) Combinación de experimentos de fluorescencia con AFM
- Estudios funcionales: a) Medidas de elasticidad en células únicas; Curvas de tensión en función de deformación por el método de nano hendiduras, que permiten calcular parámetros mecánicos de la muestra, principalmente módulo elástico y fuerza de adhesión; b) Nanomanipulación.